平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他
由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段，如該平末端DNA片段需要和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他
平末端DNA加A試劑盒
平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他
目錄號(hào)：42016
試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性：
組成 | 25次(42016-25) | 50次（42016-50） |
Taq DNA polymerase | 25ml | 50ml |
10 x A-tailing buffer | 25ml | 50ml |
dATP Mix | 25ml | 50ml |
儲(chǔ)存：-20 ℃ 保存。
產(chǎn)品介紹：
由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段，如該平末端DNA片段需要和T載體相連接，需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分，可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。
操作步驟：
1. 平末端PCR產(chǎn)物用PCR清潔（無(wú)非特異擴(kuò)增）或者膠回收純化（有非特異擴(kuò)增）。
2. 純化好的平末端DNA片段按以下反應(yīng)體系加A尾:
平末端DNA片段 | 1-7ml（不超過(guò)1mg） |
dATP Mix | 1ml |
10 x A-tailing buffer | 1ml |
Taq DNA polymerase | 1ml |
3. 輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。
4. 加A尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化，取1-2ml直接用于連接反應(yīng)。
平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他
